西安氣套式CO2培養(yǎng)箱HH.CP-T容積可定制

西安氣套式CO2培養(yǎng)箱HH.CP-T容積可定制一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)（它是人體中重要的pH緩沖系統(tǒng)），大多數(shù)培養(yǎng)液用它來(lái)保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí)，常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。

對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣，以便于氣體的交換。

是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢？人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低，如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的HCO₃^-會(huì)被耗盡，這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。

細(xì)胞培養(yǎng)液中常附加其他的pH緩沖系統(tǒng)，比如HEPES緩沖系統(tǒng)，來(lái)增加pH緩沖能力。HEPES在pH7.2-7.4之間有很強(qiáng)的緩沖能力，當(dāng)透氣的培養(yǎng)器皿被拿到二氧化碳培養(yǎng)箱外面的時(shí)候，由于空氣中二氧化碳濃度很低，培養(yǎng)液中碳酸鹽緩沖系統(tǒng)就會(huì)失去效果，這時(shí)候HEPES緩沖系統(tǒng)就能繼續(xù)保持pH的穩(wěn)定。

西安氣套式CO2培養(yǎng)箱HH.CP-T容積可定制技術(shù)參數(shù):

二氧化碳培養(yǎng)箱

二氧化碳培養(yǎng)箱是專門(mén)針對(duì)人和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的一類培養(yǎng)箱，人和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)必須在含有一定濃度的二氧化碳的環(huán)境中。常用的培養(yǎng)濃度是5%，二氧化碳濃度控制范圍：0%-20%，溫度控制范圍：室溫+5℃-50℃。常用在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。

 凍存

當(dāng)不需要使用細(xì)胞或者細(xì)胞量足夠時(shí)，可以將細(xì)胞凍存起來(lái)，供以后實(shí)驗(yàn)用

（1） 準(zhǔn)備

    細(xì)胞凍存液（20%清、10%DMSO、70%基礎(chǔ)培養(yǎng)液），梯度降溫盒

（2） 步驟

        1.選取活力好，密度約70%細(xì)胞用于凍存，此時(shí)細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，適合用于凍存。

        2 .細(xì)胞吹打或者胰酶消化后，轉(zhuǎn)移至無(wú)菌EP管，1000rpm里面5min。

        3.棄上清，加入新鮮配制的細(xì)胞凍存液，25T細(xì)胞可以加入2ml細(xì)胞凍存液，分裝2個(gè)凍存管，細(xì)胞密度為5*106-1*107個(gè)每ml。

        4.做好標(biāo)記，放入梯度降溫盒（提前平衡至室溫）。

        5.將梯度降溫盒放入-80℃冰箱過(guò)夜，第二天取出凍存管，快速放入液氮保存。